Polvo de Agar Agar Premium - Hecho en EE. UU.

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Las placas de agar se utilizan comúnmente en el cultivo de hongos para aislar y propagar el micelio de los hongos, que es la etapa de crecimiento vegetativo del hongo. El agar es una sustancia gelatinosa derivada de algas marinas y se utiliza ampliamente en microbiología y micología para cultivar varios microorganismos, incluido el micelio de hongos.

🍄 Receta de Agar para Cultivo de Hongos (MEA – Agar de Extracto de Malta)

🧪 Ingredientes (para ~1 litro / 40–50 placas)

• 20 g Extracto de Malta Ligera (fuente principal de nutrientes)
• 20 g Polvo de Agar-Agar (agente solidificante)
• 1 L Agua Destilada o Filtrada (33.81 onzas)
• (Opcional) 2 g Extracto de Levadura – ayuda a potenciar el crecimiento y vigor
• (Opcional) Unas gotas de Colorante Alimentario (para contraste, ayuda a detectar contaminación)

🔥 Paso 1: Mezcla el Medio

1. En un matraz resistente al calor o una cacerola grande, mezcla todos los ingredientes con el agua.
2. Revuelve y calienta suavemente hasta que el agar y el extracto de malta se disuelvan por completo (evita que hierva).
3. Vierte la mezcla en una botella o matraz de vidrio de 1 litro, dejando algo de espacio en la parte superior.

🫧 Paso 2: Esteriliza

1. Cierra la botella de manera suelta (para que el vapor pueda escapar).
2. Colócalo en una olla a presión o autoclave.
3. Esteriliza durante 30 minutos a 15 psi (121°C / 250°F).
4. Déjalo enfriar lentamente a alrededor de 113–122°C (cálido pero no caliente al tacto).

🧫 Paso 3: Vierte las Placas

1. En un ambiente limpio — idealmente en una Caja de Aire Estático o Campana de Flujo — vierte aproximadamente 20 mL por placa de Petri.
2. Cubra inmediatamente cada plato con su tapa para evitar la contaminación por aire.
3. Permita que las placas se solidifiquen durante 20–30 minutos.
4. Una vez que se hayan fijado, apile y envuelva en film plástico o almacene boca abajo en un recipiente limpio.

❄️ Paso 4: Almacenar

• Almacene las placas de agar selladas en el refrigerador (36–40°F / 2–4°C) por hasta 1–2 meses.
• Déjelas volver a temperatura ambiente antes de inocular.
• Las placas también pueden ser selladas al vacío o colocadas en una bolsa ziplock con una toalla de papel para absorber la condensación.

🧬 Paso 5: Consejos de Inoculación

• Esterilice con llama su lazo de inoculación, escalpelo o aguja de jeringa antes de usar.
• Trabaje rápidamente en condiciones estériles.
• Para jeringas de esporas o cultivo líquido, inyecte una pequeña gota sobre la placa.
• Para la clonación de tejidos, transfiera un pequeño trozo de tejido interno del hongo.
• Selle las placas con Parafilm o cinta eléctrica después de la inoculación.

⚗️ Variaciones Opcionales

🧫 Agar Antibacteriano de Champiñón (MEA de Gentamicina)

🧪 Ingredientes (para 500 mL / ~20 placas)

• 10 g de Extracto de Malta Ligera
• 10 g de Polvo de Agar-Agar
• 500 mL de Agua Destilada o Filtrada
• (Opcional) 1 g de Extracto de Levadura (para un mejor crecimiento)
• (Opcional) 1 gota de Colorante Alimentario (para detectar fácilmente la contaminación)
• Antibiótico: Sulfato de Gentamicina – 100 mg/L
  (Así que para 500 mL de agar, use 50 mg de gentamicina)

💡 Si no puede encontrar gentamicina, puede sustituirla por tetraciclina (50 mg/L) o cloranfenicol (50 mg/L) — ambos también inhiben bien el crecimiento bacteriano.

🔥 Paso 1: Prepare y Esterilice el Agar

1. Mezcle extracto de malta, agar, extracto de levadura y agua en un matraz o frasco.
2. Revuelva hasta que esté mayormente disuelto.
3. Cubra ligeramente la tapa o el tapón con papel de aluminio.
4. Cocine a presión a 15 psi durante 30 minutos.
5. Deje enfriar a 113–122°C (tibio al tacto, no caliente) — este paso es crucial antes de agregar antibióticos.

💊 Paso 2: Agregar Antibiótico

1. Disuelva el polvo de antibiótico en unos mililitros de agua estéril o alcohol (depende del tipo).
2. Cuando el agar esté alrededor de 113–122°C, abra en condiciones estériles y agregue el antibiótico.
3. Gire suavemente para mezclar uniformemente — no agite vigorosamente ni introduzca burbujas.

⚠️ Agregar antibióticos cuando el agar está demasiado caliente destruirá su efectividad.

🧫 Paso 3: Verter Placas

1. En un espacio de trabajo estéril (caja de aire estático o campana de flujo), vierta 20 mL por placa.
2. Reemplace las tapas inmediatamente.
3. Déjelas solidificar durante 20–30 minutos.
4. Una vez que estén listas, apílelas y envuélvalas en plástico o guárdelas en una bolsa limpia.

❄️ Paso 4: Almacenamiento

• Almacene las placas selladas en el refrigerador (36–40°F / 2–4°C).
• Las placas permanecen utilizables por 3–4 semanas antes de que la potencia del antibiótico disminuya.
• Siempre lleve a temperatura ambiente antes de inocular.

🍄 Paso 5: Usándolo

• Ideal para impresiones de esporas sucias, clones salvajes, o muestras contaminadas.
• El micelio típicamente crecerá mientras que las bacterias y el limo serán suprimidos.
• Una vez que aparezca un crecimiento limpio, transfiera un cuña limpia a una placa de agar fresca y regular (no antibiótica) para estabilizarla.

Es importante mantener condiciones estériles estrictas durante todo el proceso para prevenir la contaminación, que puede ser un desafío común en el cultivo de hongos. Usar una campana de flujo laminar o una caja de aire estático y esterilizar su equipo son cruciales para el éxito. Además, esté al tanto de los requisitos específicos para la especie de hongo que está cultivando, ya que diferentes hongos pueden tener diferentes preferencias para las recetas de agar, temperatura y humedad.